——声明：仅供医疗专业人士参考
编者按随着分子检测技术的发展，肺癌的诊治已进入精准医疗时代，需要根据组织病理学亚型和特异性的肿瘤驱动基因突变决定治疗策略。尽管肺癌的诊断手段不断丰富，但目前组织活检仍是肺癌病理诊断和分子分型的金标准，由于肺癌早期缺乏特异性的临床症状，大部分患者就诊时已是中晚期，失去了手术的最佳时机。因此，探索更准确更微创的肺癌小样本取材方法是未来的研究与发展方向。为此，智慧病理网医院病理科袁静萍博士来谈谈肺癌活检探讨之穿刺标本病理规范化处理的流程。
专家简介
袁静萍/博士/主任医院病理科医院病理教研室主任中华医学会病理学分会青年委员会委员中华医学会病理学分会第十二届委员会乳腺疾病学组委员中国抗癌协会肿瘤病理学专业委员会第一届肺癌病理学组委员湖北省医学会病理学分会副主任委员武汉市医学会病理学分会副主任委员主持省市级科研项目7项，发表科研论文百余篇，其中SCI论文18篇。肺癌活检探讨之穿刺标本病理规范化处理流程
肺癌位居我国恶性肿瘤发病之首，病理学诊断被称为诊断的金标准，然而大多数肺癌患者发现时已是晚期，无法耐受手术，如何获取准确的组织标本进行病理学检查是明确诊断与精准治疗的关键。超声引导下肺穿刺活检术作为一种微创、有效、较安全的诊断手段，可以通过细针穿刺进入病灶中抽取一部分组织进行病理学检测，从而对病变良恶性质、疾病分化程度、原发性/继发性肿瘤给予判断，因此对科学评估病情、给予正确治疗具有重要意义[1]。基于肺穿刺标本是肺癌诊断及治疗的珍贵标本来源，而其在处理过程中易挤压、断裂、破碎、丢失，影响诊断及后续免疫组化、分子病理的检测，因此只有形成一套规范化的病理处理流程，才能保证肺穿刺样本的完整性，满足病理诊断及免疫组化、分子病理的需求。
肺穿刺标本临床送检要求
标本送检的规范化对病理诊断的影响举足轻重。目前，临床上肺穿刺后活检标本大多通过多次甩动穿刺针获得，在转移标本时常采用普通镊子钳取，因此，标本常因人为的挤压、分离、破碎而影响标本的完整性。此外，送检标本常常采用纱布/滤纸包裹，直接送至病理科。由于纱布/滤纸具有较强的吸水性，新鲜穿刺的标本很容易快速黏附在纱布/滤纸表面，造成组织脱水过度，影响病理制片质量及镜下诊断；另一方面，干燥后黏连在纱布/滤纸上的穿刺组织在病理取材时更难取下来，加剧组织破碎、分离，而未及时加入固定液也会引起组织自溶，影响后续多种病理检测的进行。因此，需充分和临床沟通，对肺穿刺标本临床送检要求进行规范化[2]：
?肺穿刺后，采用生理盐水将穿刺组织从穿刺针中缓慢冲洗下来，此过程可避免甩动穿刺针造成的组织断裂。
?用眼科小弯头镊子的双镊头慢慢水平将冲洗下来的组织转移入放有固定液的穿刺专用标本瓶中，转移时勿用镊子尖端夹取组织，建议利用弯头镊弯头的弧度将组织托起进行转移，该步骤可最大程度的保证组织条的完整性和及时固定。
?建议每位患者穿刺组织条≥2条。由于肺穿刺组织大多需要做免疫组化、分子病理检测，若只穿刺一条组织，待HE、免疫组化做完后，组织已无多少剩余，难以满足后续分子病理对样本量的要求，因此需和临床沟通建议每位患者穿刺组织条≥2条，其中一条组织主要用于后续HE、免疫组化检测，另一条用于分子病理检测。
肺穿刺标本病理取材规范
由于肺穿刺标本较小，取材规范与否直接影响组织完整性。本科室通过实践建立了一套标准化的取材流程[2]（图1）：
图1肺穿刺组织规范化取材流程
?所有穿刺标本纳入“绿色通道”，取材由专人专职负责，不与其他大小标本混合，保证取材质量。
?取材前三相核对：认真核对标本瓶和病理检查单上的患者姓名、病理号是否一致，核实清楚穿刺标本的数量。
?1条组织放在一张滤纸上。
?核对组织条：打开标本瓶后，检查瓶盖上有无组织残留，用眼科小弯头镊子的双镊头捞取组织，平行放于滤纸上。
?染色标记：穿刺标本较小，需用伊红染色标记，否则后续包埋或切片时常常因看不清组织而影响操作（图2）。伊红使用前首先检查伊红浓度，染色颜色较浅，则要及时更换。点伊红时需注意的是，在组织旁边点上伊红，让伊红缓慢浸染组织，勿正对组织，避免点伊红的吸管在抽吸过程中将穿刺组织吸入，破坏组织完整性。此外，由于伊红染液在长期使用过程中可能会有杂质混入，如果直接对准组织滴加伊红可能会使少量杂质混入穿刺组织，影响后续病理判读。
?组织平行摆放：穿刺组织如果未展开直接包埋，会造成切片时所有组织不在一个平面，易造成漏诊，因此，组织条充分摆放平整，保持原有形状（图2）。
?绿色包埋框：对折滤纸，放平包好，注意保持组织形态，将直镊夹住包裹的滤纸边缘（勿夹组织中央），将组织平放入包埋框中，穿刺组织选取绿颜色的包埋框用来和其他常规组织区分，凸显“绿色通道”及组织重要性。
图2肺穿刺组织染色标记（左）；肺穿刺组织摆放方式（右）
肺穿刺标本病理制片规范
在病理制片流程中，由于穿刺标本在大小、组织形态方面与大标本差异较大，使得其在脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等技术环节均需与大标本区别开来，才能保证切片质量。由于病理技术不同环节人员不同，每位技师的操作水准各有差异，因此本科室在肺穿刺标本病理制片环节采用有经验的病理技师进行专人负责制，并经肺穿刺病理制片培训考核通过后，方能制片[2]。
?脱水、透明、浸蜡：与大标本区分，采用小标本专用脱水机，设定适宜小标本的专用脱水、透明、浸蜡程序：70%乙醇30min，80%乙醇30min，95%乙醇Ⅰ30min，95%乙醇Ⅱ30min，%乙醇Ⅰ30min，%乙醇Ⅱ各30min，TO透明剂Ⅰ40min，TO透明剂Ⅱ40min，TO透明剂Ⅲ40min，60℃液体石蜡Ⅰ45min、液体石蜡Ⅱ45min、液体石蜡Ⅲ45min。
?包埋：与其他标本分开，由专人专职负责，准备一支3号钢钉，将钢钉头向下放入包埋机镊子预热孔内预热，用包埋镊子轻轻拈起穿刺组织，平铺包埋盒底面后用钢钉头部轻轻将组织压平压实，浇蜡，冷却。
?切片、染色：切片时在一台专用切片机上由专人操作，尽可能减少粗削的厚度及次数，常规HE染色和免疫组化染色也由专人负责，区别于大标本的染色时间。
肺穿刺标本病理诊断规范
不同病理医师诊断水平的差异以及缺乏系统性的培训均会对肺穿刺活检的病理诊断产生严重影响，因此，同样需重视肺穿刺的病理诊断规范化：
?建立呼吸系统疾病病理诊断亚专科，对亚专科医生进行专业化、系统化、多样化培养，形成系统的、完整的肺疾病诊断思维（图3），推动病理诊断规范化管理。
?肺穿刺活检病理报告需由具有多年工作经验的主治及以上病理医师经过肺穿刺标本病理诊断规范化、系统化培训，有系统的肺疾病诊断思维后方能签发，并实行双签审核制。
?对疑难病例实施科内会诊制度，进一步保证诊断准确性。
?积极参与亚专科相关的学术会议和多学科讨论（MDT），了解最新进展，提高诊断水平。
图3肺疾病病理诊断思维模式图
综上所述，肺穿刺标本作为肺癌诊断及治疗的珍贵标本来源，其在标本处理过程中的规范化是保证标本检测量充足和明确诊断的前提，本科室推荐采用专人专机负责制，可避免不同人员处理手法的差异造成结果的不稳定性，也可在出现问题时更易查明问题原因，对肺穿刺标本处理过程涉及的临床送检、病理取材、制片、诊断等环节的改进大有裨益。
参考文献
[1]曲澜涛.超声引导下周围型肺内占位性病变穿刺活检的应用研究[J].系统医学,,5(11):43-45.
[2]吴昊，阎红琳，成红豆，袁静萍.穿刺活检组织标准化处理方法[J].临床与实验病理学杂志,,32(7):-.
CN-
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